本发明涉及一种从五叶松籽油中提取高纯异海松酸的方法，采用以下步骤：A、将五叶松籽油与氢氧化钾乙醇溶液按体积比混合，进行皂化，取透明滤液加HCl，取上层油液，制得混合物A；B、将尿素与甲醇混合，滴加混合物A，搅拌、抽滤、去除包合物；将滤液蒸发除去甲醇，加水稀释，再加HCl；用正己烷萃取，得混合物B；C、将混合物B溶解于丙酮，加入异丁醇胺，静置、抽滤、洗涤，得异海松酸铵盐粗品；然后用乙醇提纯，将纯化的异海松酸铵盐晶体投入乙醚，加入HCl水溶液至结晶消失，取乙醚层用水洗涤，蒸除乙醚，将剩余物溶于丙酮中，加水至结晶不再增加，然后抽滤、真空干燥，即得异海松酸。本发明具有所得异海松酸纯度高、成本低、产量高的优点。

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